图书介绍

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基因工程 从基础研究到技术原理
  • 邢万金编著 著
  • 出版社: 北京:高等教育出版社
  • ISBN:9787040490077
  • 出版时间:2018
  • 标注页数:374页
  • 文件大小:65MB
  • 文件页数:385页
  • 主题词:基因工程-高等学校-教学参考资料

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图书目录

绪论1

第一节 基因工程的诞生2

一、基因工程诞生的理论基础2

二、基因工程诞生的技术突破12

三、基因工程诞生的标志14

四、基因工程的主要操作内容17

第二节 基因工程的应用19

一、基因工程在农业中的应用19

二、基因工程在工业中的应用23

三、基因工程在医药领域的应用23

第三节 基因工程的安全性27

一、基因工程操作的安全性28

二、基因工程产品的安全性28

第一章 基因工程的基本技术与原理30

第一节 DNA的提取与纯化31

一、质粒DNA的提取31

二、基因组或其他DNA的提取35

三、DNA的浓度和纯度测定35

四、DNA相对分子质量的估计36

第二节 凝胶电泳36

一、自由溶液电泳37

二、固相支持物电泳37

第三节 基因扩增技术44

一、PCR扩增44

二、PCR技术的扩展49

第四节 核酸序列分析61

一、RNA序列分析61

二、DNA序列分析61

三、DNA序列分析的自动化68

第五节 核酸的分子杂交72

一、核酸杂交探针及其检测方法73

二、核酸分子杂交78

三、核酸杂交技术的拓展81

第二章 基因工程的酶学基础85

第一节 限制性内切核酸酶86

一、限制修饰的发现86

二、限制性内切酶的发现88

三、限制酶的分类与命名90

四、限制酶的酶活性95

第二节 内切单链DNA酶96

一、稻谷曲霉S1核酸酶96

二、Bal-31核酸酶97

第三节 外切核酸酶97

一、外切单链DNA酶98

二、外切双链DNA酶98

第四节 DNA连接酶100

一、细菌DNA连接酶101

二、T4 DNA连接酶104

三、真核生物的DNA连接酶105

四、影响DNA连接反应的主要因素106

第五节 DNA聚合酶106

一、大肠杆菌DNA聚合酶106

二、T4 DNA聚合酶110

三、T7 DNA聚合酶110

四、逆转录酶111

第六节 DNA末端修饰酶113

一、末端脱氧核苷酸转移酶113

二、T4多核苷酸激酶114

三、碱性磷酸酶116

第三章 目的基因的获取118

第一节 基因组DNA片段化119

第二节 目的基因的分离119

一、构建基因组文库120

二、构建cDNA文库123

三、富集靶DNA序列131

第三节 PCR扩增获得目的基因137

第四节 化学合成目的基因143

第四章 基因工程载体148

第一节 自然界中细菌之间的DNA交换149

一、转化149

二、接合149

三、转导150

第二节 质粒及其分配机制151

一、质粒的发现151

二、质粒的一般性质152

三、天然质粒的分配机制153

第三节 质粒载体162

一、天然质粒载体162

二、人工构建的质粒载体166

第四节 噬菌体载体182

一、单链噬菌体载体182

二、噬菌粒载体192

三、双链噬菌体载体195

四、黏粒载体210

第五节 大片段DNA克隆载体212

一、酵母人工染色体213

二、P1来源的克隆载体及P1人工染色体224

三、细菌人工染色体234

第五章 基因的体外重组和转移239

第一节 DNA片段的体外重组240

一、黏性末端的重组连接240

二、齐平末端的重组连接243

第二节 把重组DNA导入宿主细胞244

一、导入大肠杆菌244

二、导入酵母细胞247

三、导入动物细胞250

四、导入植物细胞253

第六章 重组克隆的筛选与鉴定261

第一节 基于载体基因的筛选与鉴定262

一、抗生素抗性筛选262

二、互补选择法266

三、载体DNA电泳检测法271

第二节 基于目的基因的筛选与鉴定272

一、载体插入片段的长度鉴定272

二、载体插入片段的序列鉴定272

三、目的基因的转录产物鉴定273

四、目的基因的翻译产物鉴定274

第三节 用报告基因鉴定284

一、氯霉素乙酰转移酶基因285

二、萤火虫萤光素酶基因286

三、β-葡糖醛酸糖苷酶基因286

四、荧光蛋白基因287

第七章 克隆基因的表达295

第一节 外源基因在原核细胞中表达296

一、原核表达载体的基本调控元件297

二、外源基因在大肠杆菌中的表达方式315

第二节 外源基因在酵母细胞中表达322

一、酵母表达载体的基本元件322

二、酵母表达载体的类型329

三、异源蛋白质在酵母中的分泌表达333

第三节 外源基因在植物细胞中表达335

一、植物表达载体的基本元件336

二、植物表达载体348

第四节 外源基因在动物细胞中表达358

一、哺乳动物病毒载体358

二、昆虫杆状病毒载体364

三、质粒载体367

后记373

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