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第一章 绪论1

第一节 生物制药的概念和内容1

第二节 生物药物的性质与分类2

一、生物药物的性质及质量保证2

二、生物药物的分类5

第三节 新型生物药物研制的方法9

一、新药研究和开发的主要过程9

二、先导化合物的寻找10

第四节 生物制药的发展历史和概况15

一、生物制药的发展历史15

二、生物制药的发展概况16

第五节 生物制药的发展趋势23

第六节 我国生物制药的发展状况28

一、我国生物制药的研究现状28

二、我国医药生物技术的战略对策及发展方向30

第二章 基因工程制药技术32

第一节 概述32

一、基因工程制药发展态势32

二、主要基因工程药物简介34

三、基因工程技术的特点与步骤37

第二节 基因工程制药中常用的工具酶38

一、限制性核酸内切酶38

二、DNA连接酶41

三、DNA聚合酶43

四、其他常用工具酶45

第三节 基因工程制药中常用的克隆载体47

一、质粒载体47

二、λ噬菌体载体52

三、黏粒载体56

四、M13噬菌体载体57

五、病毒载体59

第四节 基因工程药物目的基因的制取60

一、目的基因的化学合成60

二、构建基因文库法分离目的基因63

三、酶促合成法制取目的基因65

第五节 目的基因与克隆载体的体外重组71

一、目的基因与质粒载体的连接71

二、目的基因与λ噬菌体载体的连接75

第六节 重组克隆载体引入受体细胞77

一、受体细胞概述77

二、重组体DNA分子的转化或转染79

三、重组λ噬菌体DNA的体外包装与转导80

四、重组克隆载体导入哺乳动物细胞的转染81

第七节 目的重组克隆的筛选、鉴定与分析83

一、含目的基因重组克隆的筛选83

二、目的重组克隆的鉴定87

三、重组DNA的序列分析89

第八节 目的基因在宿主细胞中的表达91

一、外源目的基因在原核细胞中的表达91

二、目的基因在原核细胞中的表达形式94

三、目的基因在原核细胞中的高效表达95

四、外源目的基因在真核细胞中的表达95

第九节 基因工程菌（细胞）的培养与发酵97

一、基因工程细菌的培养与发酵98

二、基因工程酵母菌的培养与发酵101

三、基因工程细胞的培养与发酵104

第三章 细胞工程制药技术106

第一节 概述106

第二节 细胞工程常用技术108

一、细胞形态与结构的观察技术108

二、细胞组分分析技术112

三、细胞内含物观察技术112

四、细胞化学定量分析技术113

第三节 细胞融合技术113

一、细胞融合技术的发展113

二、细胞工程中遗传物质的转移途径116

三、细胞融合方法117

四、影响细胞融合的因素120

五、细胞融合操作中的技术问题120

六、杂种细胞的筛选原理及系统123

七、杂种细胞有用性状的检测系统124

八、控制杂种细胞遗传表现型的机制126

九、微生物原生质体融合技术127

十、植物原生质体的制备、培养、融合及转化技术134

十一、动物细胞融合技术144

第四节 杂交瘤技术与单克隆抗体145

一、单克隆抗体145

二、杂交瘤技术146

三、杂交瘤细胞培养及单克隆抗体的生产158

第五节 微生物转化生产甾体药物160

一、微生物转化及其特点160

二、甾体药物162

三、甾体药物生物转化反应的类型163

四、甾体药物的生物转化工艺167

第四章 酶工程制药技术173

第一节 概述173

一、酶的催化特性174

二、影响酶催化反应的主要因素175

三、酶活力测定178

四、酶的分类与命名179

第二节 药用酶的生产技术182

一、酶的生物合成及其调节183

二、药用酶生产细胞的选择189

三、药用酶生产工艺条件及其控制190

四、提高药用酶产量的措施194

五、药用酶的分子修饰197

六、酶在疾病治疗和预防方面的应用208

第三节 药物的酶法生产技术212

一、酶的选择与反应条件的确定与控制212

二、固定化酶及其在制药方面的应用214

三、酶的非水相催化及其在制药方面的应用222

四、酶在制药方面的应用233

第五章 微生物发酵制药技术239

第一节 概述239

一、微生物发酵制药发展沿革239

二、微生物发酵制药的研究范围240

三、微生物发酵药物的分类241

四、微生物发酵制药研究的发展趋势242

第二节 制药微生物与产物的生物合成242

一、制药微生物的选择242

二、制药微生物菌种的选育243

三、微生物菌种的保藏245

四、微生物代谢产物的生物合成249

五、微生物生物合成的主要调节机制256

第三节 发酵工艺条件的确定262

一、培养基及其制备262

二、灭菌操作技术268

三、发酵工艺条件的确定及主要控制参数270

第四节 发酵过程及其优化控制285

一、抗生素发酵生产285

二、维生素及辅酶类药物的生产296

三、蛋白质、多肽、氨基酸和核酸类药物298

四、微生物生产的其他药物303

第五节 微生物制药的质量控制311

一、微生物制药质量控制的意义311

二、微生物制药成品的主要检验项目312

第六章 动、植物细胞培养制药技术316

第一节 动物细胞培养制药技术316

一、概述316

二、动物细胞培养的特性323

三、动物细胞培养基的组成与制备323

四、细胞培养过程的检测330

五、动物细胞培养方法与操作方式335

六、动物细胞大规模培养系统340

七、动物细胞大规模培养技术的应用345

八、动物细胞培养制药工艺实例346

第二节 植物细胞培养制药技术350

一、植物细胞培养技术的研究进展350

二、植物细胞培养的特性与营养354

三、植物细胞培养的类型与技术361

四、植物细胞培养的应用371

第七章 生物药物的分离纯化技术380

第一节 概述380

第二节 预处理及固液分离技术384

一、概述384

二、直接从发酵液中提取产品385

三、细胞破碎386

四、离心387

五、膜分离技术388

六、膜分离技术的应用394

第三节 沉淀397

一、沉淀397

二、盐析398

三、有机溶剂沉淀399

四、其他沉淀技术399

五、亲和沉淀400

六、沉淀的应用401

第四节 萃取402

一、概述402

二、抗生素萃取操作的影响因素403

三、萃取剂的选择403

四、萃取方式404

五、萃取技术的应用405

六、脂类药物的提取和纯化406

七、双水相萃取407

八、反胶束提取纯化技术410

九、超临界萃取技术413

第五节 吸附415

一、层析415

二、离子交换技术418

三、大网格聚合物吸附423

四、凝胶过滤424

第六节 亲和层析426

一、概述426

二、共价亲和层析427

三、疏水层析428

四、固定化金属离子亲和层析429

五、免疫亲和层析430

六、染料配体亲和层析431

七、凝集素亲和层析432

八、核酸类亲和层析432

九、置换层析433

十、色谱聚焦434

十一、高压亲和层析435

第七节 药用蛋白分离纯化策略435

一、分离纯化需注意的问题435

二、合理设计层析方案436

三、蛋白质分离纯化方法的组合439

第八节 新型层析分离纯化装置及介质441

一、分离纯化装置441

二、预装柱层析介质444

主要参考文献446