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第一部分 基础生化实验1

实验一 蛋白质定量测定（一）——微量凯氏定氮法1

1 Quantitation of Protein(1)——Kjeldahl Method5

实验二 蛋白质定量测定（二）——福林-酚试剂法10

2 Quantitation of Protein(2)——Folin-Phenol Reagent Method(Lowry Method)12

实验三 蛋白质定量测定（三）——双缩脲法15

3 Quantitation of Protein(3)——Biuret Method17

实验四 蛋白质定量测定（四）——紫外分光光度法19

4 Quantitation of Protein(4)——Ultraviolet Absorption Method21

实验五 蛋白质定量测定（五）——染料结合比色法23

5 Quantitation of Protein(5)——Bradfond Method25

实验六 蛋白质定量测定（六）——BCA法27

6 Quantitation of Protein(6)——BCA Method29

实验七 核酸的定量测定（一）——紫外分光光度法31

7 Quantitation of Nucleic Acid(1)——Ultraviolet Absorption Method33

实验八 核酸的定量测定（二）——定磷法35

8 Quantitation of Nucleic Acid(2)——Phosphorus Analysis38

实验九 核酸的定量测定（三）——定糖法41

9 Quantitation of Nucleic Acid(3)——Saccharide Analysis45

实验十 动物组织中核酸的提取与鉴定49

10 Extraction and Identification of Nucleic Acid from Animal Tissue52

实验十一 质粒DNA的提取55

11 Extraction of Plasmid DNA57

实验十二 DNA序列测定——双脱氧链终止法60

12 DNA Sequencing——Dideoxy-mediated Chain Termination Method69

实验十三 多肽的末端分析80

13 Analysis of Polypeptide Termination83

实验十四 蛋白质及肽的N-末端氨基酸DNS分析——DNS法86

14 N-Terminal Amino Acid Assay of Protein or Peptide——DNS Method90

实验十五 底物浓度对酶活性的影响——蔗糖酶米氏常数的测定94

15 Influence of Substrate Concentration on Enzyme Activity——Michaelis Constant Assay of Sucrase98

实验十六 酶的竞争性抑制作用——丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制103

16 Competitive Inhibition——Malonicacid Inhibit Fumaric Reductase105

实验十七 糖的定量测定（一）——3,5-二硝基水杨酸比色法108

17 Quantitation of Saccharide(1)——3,5-Dinitro Salicylic Acid Method112

实验十八 糖的定量测定（二）——蒽酮比色定糖法及糖的纸上色谱鉴定法116

18 Quantitation of Saccharide(2)——Anthrone method and Paper Chromatography119

实验十九 维生素C的定量测定122

19 Quantitation of Vitamin C125

实验二十 维生素A的含量测定129

20 Quantitation of Vitamin A132

实验二十一 运动对尿乳酸排出量的影响136

21 Influence of Sport on Uninany Lactate138

实验二十二 肌糖原的酵解作用140

22 Glycolysis of Muscle Glycogen143

实验二十三 脂肪酸β-氧化146

23 β-Oxidation of Fatty Acid149

实验二十四 脂肪碘值的测定152

24 Iodine Value of Adipose155

第二部分 用于药物研究的生化技术实验159

实验二十五 凝胶层析法——Sephadex G-50分离核黄素与丙种球蛋白159

25 Gel Chromatography——Separating Riboflavin and Gammaglobulin by Sephadex G-50163

实验二十六 琼脂糖凝胶电泳技术分析DNA168

26 Analyze DNA by Agarose Gel Electrophoresis170

实验二十七 PCR扩增DNA片断172

27 PCR Amplify DNA Fragment174

实验二十八 Southern印迹法177

28 Southern Blotting181

实验二十九 银耳多糖的制备及一般鉴定186

29 Preparation and Identification of Tremellan189

实验三十 鱼油中不饱和脂肪酸EPA和DHA的制备192

30 Preparation of EPA and DHA from Fish Oil194

实验三十一 离子交换树脂层析分离混合氨基酸197

31 Separating Mixed Amino Acids by Ion-exchange Chromatography199

实验三十二 溶菌酶的结晶和活力测定202

32 Crystallization and Activity Assay of Lysozyme206

实验三十三 盐析法制备免疫球蛋白211

33 Preparation of Immunoglobulin by Salting Out214

实验三十四 DEAE-琼脂糖凝胶层析纯化IgG218

34 Purification of IgG Using DEAE-Sepharose Chromatography220

实验三十五 琼脂糖凝胶电泳分离LDH同工酶222

35 Separating LDH Isozyme by Agarose Gel Electrophoresis225

实验三十六 免疫电泳技术——胎儿甲种球蛋白对流免疫电泳228

36 Fetuin Assay by Counter Immunoelectrophoresis230

实验三十七 蛋白质的分子量测定——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法233

37 Molecular Weight Determination of Protein——SDS-Polyacrylamide Gel Electrophoresis236

实验三十八 聚丙烯酰胺凝胶双向电泳239

38 Two-Dimensional Polyacrylamide Gel Electrophoresis244

实验三十九 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦250

39 Polyacrylamide Gel Isoelectrofocusing253

实验四十 微量酶联免疫法测定胰岛素257

40 Insulin Assay by Enzyme Linked Immunoassay(ELISA)261

实验四十一 植物血球凝集素的提取、分离及活性检测265

41 Extraction,Separation and Activity Assay of Phytohemagglutinin268

实验四十二 固定化细胞法生产L-天冬氨酸271

42 Preparation of L-Aspartic Acid by Immobilized Cell Method274

实验四十三 偶联法制备固定化胰蛋白酶278

43 Preparation of Immobilized by Couple Method283

实验四十四 亲和层析法制取胰蛋白酶抑制剂288

44 Preparation of Trypsin Inhibitor By Affinity Chromatography292

实验四十五 α-糜蛋白酶注射剂效价测定296

45 Titer Assay of α-Chymotrypsin Injection299

第三部分 药物作用的生化分析实验302

实验四十六 观察四氯化碳中毒性肝炎血清中谷丙转氨酶的活力变化302

46 Activity Changes of Serum Alanine Transaminase in Phenixin-induced Toxic Hepatitis306

实验四十七 血清总胆固醇及甘油三酯的测定310

47 Determination of Serum Total Cholesterol and Triglyceride314

实验四十八 激素的活力测定——胰岛素与肾上腺素对血糖浓度的影响（一）318

48 Activity Assay of Hormone——Influence of Insulin and Adrenaline on Blood Glucose Concentration(1)322

实验四十九 激素的活力测定——胰岛素与肾上腺素对血糖浓度的影响（二）326

49 Activity Assay of Hormone——Influence of Insulin and Adrenaline on Blood Glucose Concentration(2)328

实验五十 药物毒性的生化分析——血清尿素氮的测定331

50 Biochemical Analysis of Drug Toxicity——Assay of Serum Urea Nitrogen333

实验五十一 有机磷化合物对胆碱酯酶的抑制作用335

51 Organic Phosphorus Compounds Inhibit Choling Esterase338

实验五十二 磺胺类药物在体内的代谢分析342

52 Metabolic Analyze of Sulfonamides in Vivo345

实验五十三 刀豆球蛋白对小鼠脾淋巴细胞DNA合成的影响348

53 Influence of Canavalin on DNA Replication of Mouse Spleen Lymphocyte350

附录353

附录一 试剂及试剂配制和保存353

附录二 层析法常用数据表368

附录三 某些蛋白质的物理性质375

附录四 氨基酸的物理常数376