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第1章 细胞的培养及分析1

第1节 哺乳动物细胞培养1

第2节 培养中细胞的生长及调控8

第3节 作为细胞和组织培养中底物的细胞外基质成分19

第4节 成纤维细胞的分离和培养27

第5节 上皮细胞的培养32

第6节 人毛细血管内皮细胞的分离36

第7节 淋巴细胞的分离与转化44

第8节 鼠胚干细胞的培养和体外分化47

第9节 原代神经细胞的分离和培养62

第10节 鸡胚胎成肌细胞的分离和培养71

第11节 新生大鼠心脏细胞的分离和培养79

第12节 成年大鼠心室肌肉细胞的分离和培养83

第13节 体细胞融合90

第14节 细胞同步化93

第15节 凋亡分析102

第16节 流式细胞计量术118

第17节 纤毛类原生动物腹纤毛类的培养和使用126

第18节 四膜虫的培养和操作132

第19节 衣藻的培养和遗传分析148

第20节 盘基网柄菌的培养和分析156

第21节 酿酒酵母的培养和转化165

第22节 非洲粟酒裂殖酵母的培养和转化182

第23节 海洋无脊椎动物胚胎的培养188

第2章 代谢标记和蛋白质修饰201

第24节 用32P-磷酸稳态标记HeLa细胞201

第25节 mRNA体外细胞核连缀转录分析207

第26节 蛋白质的代谢放射标记218

第27节 32P代谢标记细胞研究蛋白质的磷酸化223

第28节 利用透化细胞与细胞器研究蛋白质的磷酸化231

第29节 用外源底物进行蛋白质激酶分析246

第30节 激酶的动力学：应用于双相底物酶的简单酶动力学259

第31节 磷酸酶的简单制备266

第32节 蛋白质的甲基化和异戊烯化作用273

第33节 蛋白质的糖基化278

第3章 亚细胞的分离289

第34节 亚细胞的分离289

第35节 用阳离子硅胶分离技术分离细胞膜296

第36节 桥粒的分离307

第37节 粗微体的亚细胞分离310

第38节 核糖体、核糖体亚基和多核糖体的纯化326

第39节 高尔基体的分离和分析335

第40节 从哺乳动物组织中分离过氧化物酶体（微体）347

第41节 从细胞、组织中分离线粒体356

第42节 完整叶绿体的分离362

第43节 从组织或悬浮培养物中制备细胞核368

第44节 细胞核基质：用于显微和生化分析的制备377

第45节 用于细胞核蛋白输入的细胞渗透方法383

第46节 利用瞬时种间异核体分析核质穿梭389

第47节 核纤层以及富含核纤层组分的制备和鉴定393

第48节 分离核仁404

第49节 用于生化和形态分析的染色体制备410

第50节 DNA的纯化和Southern印迹分析418

第51节 细胞和组织总RNA的纯化和Northern印迹分析432

第52节 非洲爪蟾生发泡内含物的涂布制备439

第53节 从肌肉和非肌肉细胞中纯化肌球蛋白和肌动蛋白442

第54节 微管、微管相关蛋白和微管依赖的运动蛋白的分离460

第55节 中间丝的分离和纯化476

第4章 蛋白质鉴定与分析485

第56节 蛋白质浓度的测定485

第57节 蛋白质单-双向凝胶电泳490

第58节 蛋白质双向凝胶电泳501

第59节 蛋白质染色检测508

第60节 蛋白质的放射自显影、荧光显影和磷光成像检测512

第61节 一维和二维肽图515

第62节 肽的RP-HPLC图谱和纯化523

第63节 蛋白质和肽的序列分析528

第5章 蛋白质表达和相互间作用531

第64节 T7表达系统的蛋白产生531

第65节 用GST基因融合载体表达和纯化蛋白质549

第66节 杆状病毒表达：利用杆状病毒穿梭载体在大肠杆菌中产生重组杆状病毒DNA556

第67节 哺乳动物表达载体576

第68节 哺乳动物细胞中进行基因的诱导表达585

第69节 双杂交系统／相互作用陷阱598

第6章 在细胞生物学中作为工具的抗体627

第70节 抗体纯化和标记概述627

第71节 表位标记631

第72节 免疫沉淀636

第73节 免疫印迹法和免疫印迹亲和纯化639

第74节 人类自身抗体及其靶抗原的特性648

第7章 活细胞和细胞周期的观察661

第75节 用光学显微镜观察活细胞661

第76节 用荧光技术监测体内分子动力学672

第77节 噬动轨迹法分析组织培养中细胞的运动677

第78节 绿色荧光蛋白的异源表达685

第79节 荧光漂白技术700

第80节 活细胞中胞内自由钙的成像和检测717

第81节 光学镊子的构造723

第8章 大分子的制备和导入细胞733

第82节 抗体和DNA探针的荧光标记733

第83节 活体细胞的定量微注射744

第84节 爪蟾卵细胞和胚胎的注射761

第85节 啮齿类动物肌肉直接注射DNA773

第86节 哺乳动物细胞转染DNA781

第87节 利用阳离子型脂质体将DNA导入哺乳动物细胞786

第88节 电穿孔和电融合793

第89节 反义寡核苷酸的传递801

第90节 腺病毒表达载体的用途和使用方法814

第91节 复制缺陷型疱疹病毒扩增子载体及其在基因转移中的应用834

第92节 反转录病毒介导的基因转导841

第93节 使用反转录病毒载体进行谱系分析857

第9章 光学显微镜和表面荧光显微镜873

第94节 光学显微镜873

第95节 视频显微镜和图像增强912

第10章 共焦显微技术、多光子显微技术及去旋方法925

第96节 共焦显微技术及去旋技术925

第97节 多光子激发荧光显微技术941

第三卷：基因及其产物的亚细胞定位951

第11章 细胞器、蛋白质和基因表达的显像951

第98节 进行荧光显微镜观察的细胞和组织标本的制备951

第99节 组织中的β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶活性检测965

第100节 用酶检测法进行蛋白质的免疫定位976

第101节 细胞结构的非免疫荧光标记980

第102节 免疫荧光显微术简介995

第103节 微管、微管相关蛋白和中间纤维的免疫染色1004

第104节 肌动蛋白的免疫荧光定位1011

第105节 核蛋白的免疫荧光定位1015

第106节 酿酒酵母的免疫荧光方法1018

第107节 果蝇组织的免疫荧光方法1023

第108节 线虫的免疫荧光方法1031

第109节 DNA复制的分析：非同位素标记方法1037

第110节 RNA合成的分析：非同位素标记方法1046

第12章 原位杂交1055

第111节 DNA荧光原位杂交1055

第112节 染色体比较杂交1085

第113节 光谱核型分析法分析染色体1093

第114节 用3H标记探针对组织碎片标本DNA和核RNA进行原位杂交1099

第115节 果蝇染色体DNA的整体荧光原位杂交1106

第116节 RNA原位杂交1118

第117节 脊椎动物胚胎和分离器官的RNA整体原位检测1129

第118节 爪蛙胚胎RNA的整体原位检测1138

第119节 原位PCR1143

第13章 电子显微术1161

第120节 利用透射电子显微术成像1161

第121节 透射电子显微镜的样品制备方法1165

第122节 用扫描电子显微术成像1195

第123节 扫描电子显微镱的样品制备方法1206

第124节 扫描式透射电子显微术1226

第125节 DNA及DNA结合蛋白的电子显微术1235

第126节 核酸和核蛋白复合物的快速印迹法1250

第127节 电镜的细胞化学染色及酶检测1260

第128节 免疫电镜技术1278

第129节 细胞和分子的快速冷冻1291

第130节 冷冻置换1309

第131节 超薄低温切片的免疫细胞化学1315

第132节 冷冻断裂和冷冻断裂细胞化学1334

附录1 细胞生物学常用储存液、缓冲液及培养基1376

附录2 细胞生物学基本数据与资料1397

附录3 显微镜技术：镜头、滤光片及发射／激发谱1408

附录4 亚细胞组分的定位标志1419

附录5 化学试剂安全注意事项1422

附录6 供应厂商1428