生物化学实验教程PDF|Epub|txt|kindle电子书版本网盘下载

生物化学实验教程PDF格式电子书版下载

注意：本站所有压缩包均有解压码： 点击下载压缩包解压工具

第一章　生物化学实验基本知识1

一、生物化学实验室规则1

二、生物化学实验记录和实验报告的书写1

（一）实验记录1

（二）实验报告2

三、生物化学实验分析方法的选择2

（一）方法和标准品的分级2

（二）方法选择的要求3

（三）方法选择的步骤3

四、生物化学实验分析方法的评价4

（一）精密度4

（二）准确性和特异性5

（三）灵敏度5

（四）其他5

五、常用实验样品的收集制备5

（一）血液样品6

（二）尿液样品6

（三）组织样品6

六、生物化学实验常用仪器设备基本操作7

（一）玻璃仪器的洗涤及干燥7

（二）吸量管的种类和使用8

（三）微量加样器的使用9

（四）溶液的混匀方法10

（五）离心机的使用11

（六）分光光度计的原理及使用13

（七）PCR仪的原理及使用15

七、生物化学常用实验技术17

（一）离心技术17

（二）光谱分析技术19

（三）电泳技术23

（四）层析技术27

（五）基因工程技术33

（六）酶免疫技术37

（七）放射性同位素技术38

（八）PCR技术39

（九）杂交技术41

（十）RNAi技术41

第二章　蛋白质实验43

实验一　蛋白质含量的测定43

一、双缩脲法测定血清总蛋白43

二、紫外分光光度法测定血清蛋白质45

三、酚试剂法测定蛋白质46

四、溴甲酚绿法测定血清清蛋白48

五、考马斯亮蓝法测定蛋白质50

实验二　蛋白质的沉淀、变性反应52

一、蛋白质的盐析52

二、重金属沉淀蛋白质53

三、生物碱和有机酸沉淀蛋白质53

四、无机酸沉淀蛋白质54

五、有机溶剂沉淀蛋白质55

六、加热变性沉淀蛋白质55

实验三　血清蛋白质的盐析及清／球比的测定56

实验四　蛋白质等电点的测定58

实验五　血清蛋白质的醋酸纤维素薄膜电泳59

实验六　聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质62

实验七　等点聚焦电泳分离血清蛋白质65

实验八　凝胶层析法（分子筛）测定蛋白质分子量67

实验九　SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量69

第三章　酶实验72

实验十　影响唾液淀粉酶活性的因素72

一、温度对唾液淀粉酶活性的影响72

二、酸碱度对唾液淀粉酶活性的影响73

三、激活剂和抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响74

实验十一　作用物浓度及酶浓度对酶反应速度的影响75

实验十二　酶的特异性与高效性78

一、酶的特异性78

二、酶的高效性79

实验十三　单底物酶米氏常数（Km）测定80

一、碱性磷酸酶的Km测定80

二、蔗糖酶Km测定83

三、脲酶Km值的测定85

实验十四　丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制作用88

实验十五　血清乳酸脱氢酶同工酶的电泳分离90

一、醋酸纤维薄膜电泳分离血清乳酸脱氢酶同工酶90

二、琼脂糖凝胶电泳分离血清乳酸脱氢酶同工酶92

三、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清乳酸脱氢酶同工酶95

实验十六　乳酸脱氢酶及辅酶的作用97

实验十七　细胞色素体系的作用及其抑制98

实验十八　血清谷丙转氨酶活性测定100

第四章　物质代谢103

实验十九　血糖浓度的测定103

一、邻甲苯胺法103

二、葡萄糖氧化酶法105

实验二十　糖耐量试验106

实验二十一　尿糖的定性测定107

实验二十二　胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响109

实验二十三　糖的酵解作用111

实验二十四　饱食和饥饿对肝糖原含量的影响113

实验二十五　剧烈运动对尿中乳酸含量的影响115

实验二十六　酮体的生成与氧化116

一、亚硝基铁氰化钠法116

二、碘量法测定118

实验二十七　血清甘油三酯的测定120

一、乙酰丙酮显色法120

二、磷酸甘油氧化酶法122

实验二十八　血清胆固醇的测定124

一、邻苯二甲醛显色法124

二、醋酸酐-硫酸显色法126

三、胆固醇氧化酶法127

实验二十九　血清磷脂的测定128

实验三十　血清脂蛋白的分离130

一、琼脂糖凝胶电泳法130

二、超速离心法132

实验三十一　免疫透射比浊法测定脂蛋白（a）133

实验三十二　磷钨酸-镁沉淀法测定血清HDL-胆固醇135

实验三十三　薄膜层析法分离血清脂类137

实验三十四　血清过氧化脂质的测定138

实验三十五　血清尿素氮的测定140

一、二乙酰一肟法测定血清尿素140

二、速率法测定血清尿素142

三、血清尿素氮测定（脲酶-Berthelot比色法）143

实验三十六　精氨酸酶与尿素的生成145

一、纸片法145

二、扩散皿法147

实验三十七　转氨基作用与氨基酸纸层析148

实验三十八　血清尿酸测定150

实验三十九　血清总胆红素和结合胆红素测定——改良Jendrassik-Grof（J-G）法152

实验四十 胡萝卜素的柱层析分离155

实验四十一　血红蛋白及核黄素的凝胶层析分离156

实验四十二　维生素C的测定——2,6-二氯酚靛酚滴定法159

实验四十三　血清钙的测定（甲基百酚兰比色法）162

实验四十四　血磷的测定——还原钼蓝法164

实验四十五　血浆二氧化碳结合力测定——酸碱滴定法165

第五章　核酸分子生物学实验167

实验四十六　动物组织中核酸的提取与鉴定167

实验四十七　组织DNA、RNA分离、提纯及鉴定170

实验四十八　核酸的增色效应172

实验四十九　核酸的定量测定173

一、定磷法173

二、紫外分光光度法175

三、RNA的定量测定（苔黑酚法）177

四、DNA的定量测定（二苯胺法）178

实验五十　质粒DNA的提取与琼脂糖凝胶电泳鉴定180

实验五十一　质粒DNA的酶切与鉴定184

实验五十二　质粒DNA的转化186

实验五十三　聚合酶链反应（PCR）技术188

实验五十四　Southern杂交190

实验五十五　Northern杂交194

实验五十六　Western杂交197

实验五十七　聚丙烯酰胺凝胶电泳银染色分析DNA199

实验五十八　从琼脂糖凝胶中分离回收DNA片段201

实验五十九　DNA片段的连接反应203

实验六十　外源基因在大肠杆菌中的诱导表达205

第六章　生物化学实验附录208

一、实验基础知识208

（一）元素相对原子量表208

（二）实验室常识209

（三）实验误差的产生与处理210

（四）离心机转速与相对离心力（RCF）的换算210

二、试剂的配制211

（一）配制试剂注意事项211

（二）化学药品的分类、分级212

（三）易变质及需要特殊方法保存的试剂212

（四）纯水的制备和检验213

（五）常用酸碱试剂的比重和浓度213

（六）常用洗液的配制及应用214

（七）常用标准溶液的配制214

（八）常用酸碱指示剂的选择及运用215

（九）常用缓冲液的配制216

（十）饱和硫酸铵的配制220

（十一）一些常用化合物的溶解度221

（十二）聚丙烯酰胺凝胶电泳常用染色法222

三、常用层析基质222

（一）离子交换纤维素222

（二）聚丙烯酰胺凝胶的技术数据223

（三）琼脂糖凝胶的技术数据223

（四）凝胶过滤层析介质的技术数据224

（五）离子交换层析介质的技术数据226

四、常用缓冲液及培养基的配制227

（一）常用缓冲液227

（二）电泳缓冲液及凝胶加样缓冲液227

（三）储备液的配制229

（四）常用培养基的配制230

五、生化与分子生物学常用数据库及网址232