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引言1

第1章 形态学制片种类3

一、非切片制作方法3

二、组织切片制作方法8

第2章 组织学石蜡切片制作技术9

第1节 标本取材9

一、实验动物的处死方法10

二、不同组织器官的取材方法13

三、取材注意事项15

附：大鼠胸、腹腔脏器的取材方法16

第2节 标本固定21

一、固定的目的和作用21

二、固定的方式22

三、影响固定作用的因素27

四、固定后的标本修整33

五、固定后的标本冲洗33

六、固定容器35

七、常用固定剂的性质及应用36

第3节 标本处理过程：脱水、透明、浸蜡、包埋48

一、脱水48

二、透明51

三、浸蜡53

四、包埋55

第4节 石蜡切片60

一、石蜡切片机与切片刀60

二、石蜡切片技术68

第5节 染色与染料83

一、染色与生物染料83

二、染色作用的原理87

三、染色方法88

四、媒染剂和促染剂91

五、染色形式93

第6节 苏木精-伊红染色94

一、苏木精94

二、伊红100

三、石蜡切片苏木精-伊红染色102

第7节 封固111

一、封固的目的111

二、封固剂种类111

三、封固剂的折光率113

四、常规石蜡切片封固方法114

第3章 特殊染色技术119

第1节 胶原纤维染色121

一、形态结构与特点121

二、胶原纤维染色121

三、磷钼酸和（或）磷钨酸在染色中的作用127

四、影响结缔组织三色染色的因素127

附：苦味酸-天狼猩红染色显示胶原纤维129

第2节 弹性纤维染色130

一、形态结构与特点130

二、弹性纤维染色130

第3节 网状纤维染色138

一、形态结构与特点138

二、网状纤维铵银技术的基本步骤与作用139

三、常用的铵银方法141

四、网状纤维铵银方法的基本要求146

第4节 肥大细胞染色147

一、形态结构与特点147

二、肥大细胞染色148

三、异染性150

第5节 胰岛细胞染色151

一、胰岛细胞形态特点151

二、胰岛细胞染色152

第6节 糖原染色157

一、显示糖原的高碘酸-雪夫（PAS）反应157

二、Best卡红染色显示肝糖原162

第7节 细胞内DNA和RNA染色163

一、Feulgen反应显示DNA163

二、甲绿-派若宁染色显示DNA和RNA166

第8节 肌组织染色168

一、Heidenhain铁苏木精染色168

二、Mallory磷钨酸-苏木精（PTAH）染色170

第9节 神经元（细胞）尼氏体染色171

一、焦油紫染色171

二、甲苯胺蓝染色173

三、硫堇染色174

四、Luxol坚牢蓝-焦油紫染色174

第4章 免疫组织（细胞）化学技术176

第1节 免疫组织（细胞）化学相关的基本概念177

一、抗原177

二、抗体178

第2节 免疫组织（细胞）化学基本类型与原理183

一、免疫组织（细胞）化学直接法183

二、免疫组织（细胞）化学间接法184

三、非标记抗体法186

四、抗生物素-生物素法188

第3节 免疫组织（细胞）化学技术的种类191

第4节 免疫组织（细胞）化学技术的基本过程192

第5节 免疫组织（细胞）化学石蜡切片的有关基本技术192

一、用于免疫组织（细胞）化学的标本取材193

二、用于免疫组织（细胞）化学的标本固定194

三、用于免疫组织（细胞）化学的标本处理过程：脱水、透明、浸蜡、包埋197

四、用于免疫组织（细胞）化学石蜡切片的制作198

五、常用的免疫组织（细胞）化学方法201

六、免疫组织（细胞）化学染色主要步骤及注意事项205

七、血清封闭排除非特异性着色213

八、减少或消除内源性生物素213

九、抗体214

十、显色217

十一、检测系统221

十二、免疫组织（细胞）化学复染221

十三、孵育盒的作用222

十四、封固剂的使用223

十五、免疫组织（细胞）化学结果与非特异染色的控制223

十六、常见的免疫组织（细胞）化学问题227

第6节 双重免疫组织（细胞）化学技术229

一、双重免疫标记染色种类229

二、常用的双重免疫标记配伍类型230

三、双重免疫组织（细胞）化学的基本种类231

四、常用的双重免疫组织（细胞）化学染色方法231

五、消除双重免疫组织（细胞）化学染色间抗体系统的交叉反应236

附：常用的酸性溶液洗脱方法与应用238

六、双重免疫组织（细胞）化学注意事项239

第5章 原位核酸分子杂交243

第1节 原位核酸分子杂交的基础知识243

一、核酸的化学组成243

二、DNA和RNA244

三、DNA变性与复性244

第2节 原位分子杂交的基本原理246

一、基本原理246

二、探针类型与制备247

三、探针标记物与探针标记方法249

第3节 原位核酸分子杂交技术的基本步骤与原理251

一、杂交前准备251

二、杂交预处理253

三、杂交反应254

四、杂交后处理258

五、杂交体的检测258

第4节 对照实验和实验中的问题与对策259

一、对照实验259

二、实验中的问题与对策259

第6章 形态学技术实验指导262

实验1 标本取材与固定262

实验2 标本的处理：脱水、透明、浸蜡、包埋263

实验3 石蜡切片265

实验4 苏木精-伊红（HE）染色267

实验5 胶原纤维染色和弹性纤维染色268

实验6 细胞染色270

实验7 网状纤维铵银技术271

实验8 PAS反应及Schiff试剂配制272

实验9 肌组织染色273

实验10 尼氏体染色275

实验11 免疫组织（细胞）化学染色276

实验12 免疫组织（细胞）化学双重染色277

实验13 免疫组织（细胞）化学染色与特殊染色278

第7章 附录281

附录1 常用试剂的配制281

附录2 玻璃制品的清洁284

附录3 常用染料的中英文名称286

附录4 石蜡切片评估标准及计分288

附录5 动物常用麻醉剂的用法和剂量289

附录6 生物染料的分类—根据染色对象分类291

附录7 石蜡切片操作所遇到的常见问题292

附录8 苏木精-伊红染色技术流程294