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第一编 总论1

第一章 蛋白质的表征 夏其昌1

一、蛋白质的结构和纯化1

二、蛋白质的定量（溶液中的蛋白质浓度）5

三、蛋白质的脱盐（除盐和非共价结合的小分子）6

四、纯度7

五、分子量7

六、等电点8

七、氨基酸分析8

八、蛋白质及多肽的末端分析9

九、光谱9

十、肽谱9

第二章 蛋白质的样品准备和专一性裂解 夏其昌12

一、蛋白质样品的准备12

二、蛋白质的化学裂解13

三、常用的蛋白水解酶酶解16

四、蛋白质中存在着封闭的N端18

五、蛋白质中的C端残基的测定19

六、蛋白质中一些特殊肽段的检出20

第二编 色谱23

第三章 氨基酸组成分析 邵晓霞张丽华23

一、氨基酸组成分析的目的23

二、水解方法24

三、特殊氨基酸的保护和定量26

四、氨基酸组成原位分析27

五、衍生方法及原理27

六、测定氨基酸组成的实验步骤30

七、结语32

第四章 蛋白质化学中的层析技术 王克夷35

一、层析的原理和分类35

二、层析的基本操作过程和层析的装置40

三、常用的一些层析基质45

四、各类层析用于蛋白质分离的实例51

第五章 高效液相色谱（HPLC） 夏其昌72

一、柱72

二、柱的新进展74

三、泵76

四、用途77

五、讨论77

第六章 蛋白质和多肽的氨基酸序列测定 徐来根屠红旻曾嵘80

一、N端分析原理80

二、N端蛋白质序列仪81

三、影响N端Edman反应裂解率的因素84

四、测序前样品处理86

五、手工N端测序88

六、C端序列分析91

第三编 电泳99

第七章 聚丙烯酰胺凝胶电泳和电印迹 屠红旻99

一、概述99

二、操作步骤99

三、几种不同凝胶电泳系统及其应用102

四、电印迹108

五、结束语110

第八章 蛋白质等电聚焦 龚蓁蓁112

一、原理112

二、盘状等电聚焦（DiscIEF）113

三、薄层IEF116

四、制备等电聚焦118

五、等电聚焦中注意的几点121

六、IEF的优点和缺点122

第九章 双相凝胶电泳 龚蓁蓁124

一、引言124

二、试剂、设备和储存液配制125

三、实验操作127

四、蛋白质固定和银染方法131

五、凝胶干板的制作133

第十章 毛细管电泳 屠红旻136

一、基本原理136

二、操作步骤及注意事项139

三、毛细管电泳分离模式140

四、结束语149

第十一章 连续自由流电泳 夏其昌宋金芳151

一、原理151

二、仪器153

三、工作模式154

四、CFE在微重力下的优点154

五、“纯理论”研究155

六、一些影响因素155

七、应用156

八、结语和展望158

第十二章 制备级液相等电聚焦 夏其昌邵晓霞159

一、旋转式等电聚焦159

二、循环式等电聚焦160

三、制备型连续流等电聚焦163

第四编 其他物化方法165

第十三章 质谱技术在蛋白质、多肽化学中的应用 金善炜李一莉165

一、前言165

二、几种质谱技术简介165

三、质谱在蛋白质结构测定中的应用169

第十四章 生物分子核磁共振波谱技术 吴厚铭184

一、样品要求与制备方法185

二、NMR实验数据的采集192

三、残基自旋体系识别和序列归属198

四、结构约束因子和特征二级结构分析207

五、三维结构计算222

第五编 蛋白质化学和生物工程产品的质控235

第十五章 蛋白质化学分析和生物工程产品的鉴定 夏其昌235

一、蛋白质含量235

二、蛋白质的纯度236

三、蛋白质的分子量测定237

四、蛋白质的等电点测定239

五、氨基酸定量分析239

六、肽谱240

七、质谱242

八、N端序列244

九、C端分析244

十、蛋白质的二硫键分析245

十一、突变点的分析247

十二、原位分析和快速分析248

十三、其他添加剂的问题248