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第一章 生物化学实验基本知识1

1.1 生物化学实验室规则1

1.2 生物化学实验室安全与防护常识1

1.3 化学药品的使用和储藏3

1.4 实验误差与数据处理7

1.5 实验记录与报告10

1.6 实验室常用仪器的使用12

第二章 现代生化实验技术基本原理24

2.1 生物化学实验技术发展简史24

2.2 离心技术25

2.3 光谱技术31

2.4 层析技术37

2.5 电泳技术47

2.6 免疫化学技术60

2.7 基因工程技术66

2.8 生物大分子的制备71

第三章 基础实验89

实验1 糖的呈色反应和定性鉴定89

实验2 总糖和还原糖的测定（一）——费林试剂热滴定法93

实验3 总糖和还原糖的测定（二）——3,5-二硝基水杨酸法96

实验4 血糖含量的测定——邻甲苯胺法99

实验5 粗脂肪的定量测定101

实验6 食品油脂中过氧化值的测定103

实验7 油脂中酸值的测定105

实验8 脂肪碘值的测定107

实验9 血清总胆固醇的测定109

实验10 蛋白质的两性性质及等电点的测定111

实验11 蛋白质的定量测定（一）——微量凯氏定氮法113

实验12 蛋白质的定量测定（二）——双缩脲法116

实验13 蛋白质的定量测定（三）——Folin-酚法119

实验14 蛋白质的定量测定（四）——紫外（UV）吸收测定法122

实验15 蛋白质的定量测定（五）——考马斯亮蓝染色法124

实验16 蛋白质的定量测定（六）——BCA法126

实验17 牛乳中酪蛋白的制备128

实验18 紫外吸收法测定核酸的含量130

实验19 酵母RNA的提取及组分鉴定132

实验20 质粒DNA的微量制备134

实验21 小牛胸腺DNA的制备——浓盐法137

实验22 植物中DNA的提取139

实验23 胰蛋白酶的制备141

实验24 胰蛋白酶活力的测定144

实验25 影响酶促反应的因素——温度、pH值和抑制剂146

实验26 底物浓度对酶促反应速度的影响——米氏常数的测定149

实验27 酶的特性——底物专一性151

实验28 乳酸脱氢酶活力测定153

实验29 多酚氧化酶的纯化和活力测定155

实验30 脂肪酶活力的测定157

实验31 维生素A的测定159

实验32 维生素B1的荧光测定法161

实验33 维生素B2（核黄素）的荧光测定法163

实验34 肾上腺素的提取和测定166

实验35 叶绿素含量测定168

实验36 总黄酮的提取和测定169

实验37 肌糖原的酵解作用171

实验38 发酵过程中无机磷的利用173

实验39 氨基转换作用175

实验40 脂肪酸β-氧化177

第四章 技术实验179

实验41 蛋白质相对分子质量的测定——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法179

实验42 不同相对分子质量蛋白质的分离——凝胶柱层析法182

实验43 醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白185

实验44 氨基酸的分离与鉴定——双向层析法188

实验45 离子交换层析法分离氨基酸191

实验46 聚丙烯酰胺等电聚焦电泳193

实验47 质粒DNA限制性酶切及琼脂糖凝胶电泳分离鉴定197

实验48 Southern印迹杂交201

实验49 Western blot印迹法203

实验50 兔抗人血清抗体的制备和效价测定206

实验51 单向定量免疫电泳209

实验52 酶联免疫吸附测定211

实验53 TLC、HPLC法分离鉴定含氮杂环化合物215

实验54 自由流电泳分离纯化细胞色素C217

第五章 设计实验220

实验55 果蔬维生素C含量测定及其分析220

实验56 单细胞凝胶电泳法检测DNA的断裂损伤223

实验57 转基因食品的PCR定性检测226

第六章 综合实验229

实验58 重组蛋白质的表达、分离、纯化和鉴定229

实验59 基因克隆技术——pGEX-XY1重组质粒的构建和鉴定233

实验60 天然产物中多糖的提取、纯化与鉴定242

附录245

一、常用缓冲液的配制245

二、酸、碱、盐及有机溶剂的基本数据250

三、硫酸铵饱和度的常用表252

四、常见蛋白质相对分子质量参考表254

五、凝胶染料的种类及特点255

六、层析法常用数据表及性质256

参考文献260