图书介绍
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- 汪晓峰，杨志敏主编 著
- 出版社： 北京：高等教育出版社
- ISBN：9787040286168
- 出版时间：2010
- 标注页数：177页
- 文件大小：36MB
- 文件页数：185页
- 主题词：生物化学－化学实验
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图书目录
第一章 缓冲溶液的作用原理及配制1
第一节 缓冲溶液的作用原理1
一、缓冲溶液的作用原理1
二、缓冲容量与缓冲范围2
第二节 缓冲溶液的配制2
一、影响缓冲溶液pH的因素及缓冲溶液的选择与配制2
二、缓冲溶液的应用原则3
三、不同缓冲溶液的优缺点3
第二章 生物材料的预处理7
第一节 生物样品的保存7
一、新鲜固态样品的保存7
二、液态样品的保存7
第二节 生物材料预处理技术8
一、细胞的破碎8
二、提取与纯化10
第三章 实验误差控制15
第一节 实验误差15
一、实验误差15
二、精密度和偏差15
三、实验误差的来源16
第二节 提高准确度的方法17
一、减少系统误差的方法17
二、减少偶然误差的方法18
三、正确取舍有效数字18
第四章 蛋白质研究技术与方法20
第一节 蛋白质分离纯化的一般方法20
一、以蛋白质溶解度为基础的分离方法20
二、以蛋白质电荷性质为基础的分离方法20
三、以蛋白质分子大小为基础的分离方法24
四、以蛋白质生物活性为基础的分离方法25
第二节 蛋白质分离纯化的新技术与新方法25
一、蛋白质二维荧光差异凝胶电泳技术25
二、毛细管电泳27
三、反相液相色谱法28
四、反胶团萃取法28
五、蛋白质分离方法的选择、组合和优化29
实验一 蛋白质含量测定法29
Ⅰ．微量凯氏定氮法（Kjeldahl法）30
Ⅱ．双缩脲法（Biuret法）33
Ⅲ．Folin－酚试剂法（Lowry法）34
Ⅳ．考马斯亮蓝法（Bradford法）36
Ⅴ．紫外吸收法39
Ⅵ．二喹啉甲酸法（BCA法）42
实验二 小麦钙调蛋白的分离、纯化44
实验三 小麦钙调蛋白的抗体制备及检测46
实验四 植物组织蛋白质二维电泳分离分析49
第五章 酶学研究技术与方法59
第一节 酶活力测定及酶的纯度与回收率59
一、酶活力测定59
二、纯化方法与条件的比较标准60
三、纯度标准60
第二节 酶活力测定的常用技术和方法61
一、量气法61
二、比色法与分光光度法61
实验五 苯丙氨酸解氨酶的纯化及活性测定62
Ⅰ．PAL的提取及测定——离心和盐析的应用63
Ⅱ．PAL的纯化——分子筛和离子交换层析的应用65
实验六 Eadie-Hofstee法测定辣根过氧化物酶的Km和Vmax67
实验七 酶偶联分析法测定植物己糖激酶的活力70
实验八 两相分配法制备大豆子叶质膜及其纯度鉴定73
实验九 金属螯合亲和层析分离纯化玉米SOD79
实验十 大豆胰蛋白酶抑制剂的分离提取以及生物化学性质表征82
第六章 核酸研究技术和方法90
第一节 核酸研究的基本要求90
一、材料与方法的选择90
二、选择的原则90
三、核酸完整性的保持90
第二节 技术路线的设计91
一、核酸的释放91
二、核酸的分离与纯化91
三、核酸质量与提取步骤的关系91
四、核酸的浓缩、沉淀与洗涤91
实验十一 植物基因组DNA的提取及含量、纯度检测92
Ⅰ．植物基因组DNA的提取（CTAB法）92
Ⅱ．植物DNA纯度的鉴定——紫外分光光度计法94
Ⅲ．植物DNA相对分子质量的测定——琼脂糖凝胶电泳法94
实验十二 一步法共提取昆虫中肠DNA、RNA及蛋白质96
实验十三 小RNA的分离纯化99
Ⅰ．小RNA分离、纯化及修饰99
Ⅱ．修饰后小RNA的克隆转化及测序104
Ⅲ．测序结果的生物信息学分析106
实验十四 油菜cDNA文库的构建107
Ⅰ．植物组织总RNA的提取及电泳分析107
Ⅱ．cDNA文库的构建109
实验十五 Southern印迹112
第七章 糖类研究技术和方法118
第一节 糖生物化学研究总论118
第二节 糖的提取及纯化119
第三节 多糖的组成分析119
第四节 多糖的结构分析121
实验十六 还原糖和总糖的测定123
实验十七 非还原糖的高效液相色谱分析125
实验十八 可溶性糖的硅胶G薄层层析128
实验十九 黏多糖——肝素效价的测定130
实验二十 水溶性苦瓜多糖的制备及分离纯化132
实验二十一 醋酸纤维素薄膜电泳鉴定山楂多糖135
实验二十二 多糖结构分析137
Ⅰ．糖含量测定138
Ⅱ．单糖组成分析139
Ⅲ．糖链的序列测定140
第八章 植物次生代谢物概述144
第一节 次生代谢物的概念与特性144
一、次生代谢物的概念144
二、次生代谢物的特性144
第二节 次生代谢物的研究方法144
一、同位素示踪法145
二、细胞培养法145
三、荧光标记法146
四、单细胞凝胶电泳法146
实验二十三 红豆杉紫杉醇生物碱的分离与鉴定147
实验二十四 植物倍半萜的分离与酸化度分析149
实验二十五 黄连中黄连素的提取及其紫外光谱分析151
Ⅰ．黄连中黄连素的提取151
Ⅱ．黄连素的紫外光谱分析152
实验二十六 虎杖蒽醌类成分的提取分离及结构鉴定154
实验二十七 植物材料中总黄酮分离提取及鉴定156
实验二十八 从茶叶中提取咖啡因157
附录162
附录一 离心技术162
附录二 常用蛋白质Mr标准参照物166
附录三 常用缓冲溶液的配制方法166
附录四 实验室中常用酸碱的相对密度和浓度172
附录五 硫酸铵饱和度的常用表173
附录六 常用相关网站174
主要参考文献176