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目录1

第一章　细菌人工染色体技术及其在动物病毒研究中的应用1

第一节　概述1

一、细菌人工染色体的构建及其发展2

二、Cre/LoxP位点特异性重组系统2

三、细菌人工染色体的应用4

第二节　伪狂犬病病毒细菌人工染色体及其应用5

一、伪狂犬病毒5

二、伪狂犬病病毒细菌人工染色体的构建8

三、伪狂犬病病毒细菌人工染色体的应用12

第三节　马立克病毒细菌人工染色体13

一、基本原理13

二、应用14

三、展望15

参考文献15

第二章　假病毒技术及其应用17

第一节　概述17

第二节　假病毒技术的相关知识18

一、表型及表型混合18

二、反转录病毒的结构及特性21

一、假病毒构建的原理27

第三节　假病毒技术的原理及其应用27

二、假病毒构建的方法29

三、假病毒技术的优缺点31

四、假病毒技术构建的一般程序31

五、假病毒构建的注意事项32

第四节　几种常用的假病毒构建体系33

一、鼠类白血病病毒假病毒构建体系33

二、人类免疫缺陷病毒假病毒构建体系34

二、血凝素36

第五节　假病毒技术在禽流感病毒研究中的应用36

一、禽流感概述36

三、禽流感病毒假病毒体系的构建39

第三章　反向遗传技术与动物传染病的防制44

第一节　概述44

第二节　反向遗传技术的基本原理和发展概况45

一、反向遗传技术的基本原理45

二、反向遗传技术的发展45

一、反向遗传技术的技术路线47

第三节　反向遗传技术的技术路线和要点47

二、反向遗传技术的要点50

第四节　反向遗传技术在几个重要动物疫病防制中的应用前景51

一、病毒基因结构与功能的研究52

二、新型疫苗的研究55

三、开发新型病毒载体57

参考文献59

一、禽痘病毒66

第二节 禽痘病毒的分子生物学特性及其作为痘苗载体的优势66

第一节　概述66

第四章　禽痘病毒载体疫苗及其在动物生产中的应用66

二、禽痘病毒表达载体的优点67

第三节　重组禽痘病毒的构建68

一、重组禽痘病毒的构建步骤68

二、外源基因的表达调控结构69

三、重组病毒的筛选71

四、构建重组病毒时应注意的事项72

一、传染性法氏囊病重组疫苗73

二、鸡新城疫重组疫苗73

第四节　重组禽痘疫苗在几种常见禽病防制中的应用73

三、传染性支气管炎重组疫苗74

四、传染性喉气管炎病重组疫苗74

五、禽流感重组疫苗75

六、马立克病重组疫苗75

第五节　重组禽痘病毒疫苗的安全性及前景展望78

一、安全性78

二、应用前景78

三、存在问题78

参考文献79

第五章　腺病毒和腺病毒载体的研究及应用82

第一节　腺病毒及其特征82

一、概述82

二、腺病毒的基本特征82

第二节　腺病毒载体及其应用84

一、腺病毒载体的优点及改造策略84

二、腺病毒载体的应用85

参考文献86

第一节　马立克病毒载体87

一、概述87

第六章　重组马立克病疫苗87

二、马立克病毒生长的非必需区88

第二节　预防禽病的重组马立克病毒疫苗94

一、新城疫94

二、传染性法氏囊病97

三、结语97

参考文献97

第七章　重组伪狂犬病疫苗研究102

第一节　伪狂犬病概述102

第二节　伪狂犬病基因工程亚单位疫苗103

第三节　伪狂犬病核酸疫苗104

第四节　重组伪狂犬病毒疫苗105

一、以腺病毒为载体的重组伪狂犬病毒疫苗105

二、以痘苗病毒为载体的重组伪狂犬病毒疫苗105

三、以猪痘病毒为载体的重组伪狂犬病毒疫苗105

四、以其他疱疹病毒为载体的重组伪狂犬病毒疫苗106

五、以伪狂犬病毒为载体的重组伪狂犬病毒疫苗106

第五节　基因工程缺失疫苗107

一、自然弱毒疫苗107

二、缺失疫苗108

三、插入报告基因的基因缺失疫苗110

四、伪狂犬病毒基因缺失疫苗的优势112

第六节　基因工程活载体疫苗112

第七节　小结与展望114

第八章　动物干扰素的研究及应用115

第一节　干扰素概述115

一、干扰素基因及其蛋白质115

二、干扰素诱生剂117

三、干扰素的生物学功能118

四、干扰素生物工程122

五、干扰素的应用123

参考文献124

第二节　基因工程猪干扰素的研究126

一、猪干扰素的分类及其产生细胞126

二、猪干扰素的基因工程研究127

三、猪干扰素的抗病毒作用研究129

四、重组猪干扰素免疫调节活性的研究131

五、猪体内病原特异的γ干扰素水平与机体抗病毒免疫保护的相关性研究132

六、结语132

参考文献133

第三节　鸡干扰素的研究与生产应用135

一、鸡干扰素研究概况135

二、国内重组鸡干扰素的最新研究进展136

三、鸡的基因工程干扰素在临床使用时需了解的事项139

四、重组鸡干扰素的应用前景139

第四节　基因工程犬α干扰素140

一、犬α干扰素研究现状140

二、笔者实验室的工作140

第一节　抗生素问题及抗菌肽概况142

第九章　抗菌肽及其应用142

第二节　抗菌肽的特性143

一、抗菌肽与传统抗生素的差异143

二、抗菌肽的结构特点144

三、抗菌肽的作用机制144

四、抗菌肽结构与功能的关系147

五、胞膜结构对抗菌肽活性的影响148

第三节　抗菌肽的来源与分布148

一、哺乳动物抗菌肽149

二、两栖类动物抗菌肽152

三、昆虫抗菌肽154

四、海洋生物抗菌肽160

五、植物抗菌肽161

第四节　抗菌肽的基因工程研究现状163

第五节　抗菌肽目的基因的获得及相关技术165

一、重叠区扩增基因拼接法165

二、降落PCR168

三、正义链和反义链的磷酸化、退火169

第六节　抗菌肽表达策略170

一、抗菌肽原核表达策略171

二、抗菌肽真核表达策略176

三、抗菌肽基因工程表达产物的检测177

第七节　抗菌肽的应用及其前景177

一、抗菌肽在转基因工程中的应用177

二、抗菌肽在医药生产中的应用178

三、抗菌肽在食品防腐剂中的应用178

四、抗菌肽在饲料添加剂中的应用179

第十章　动物疫病诊断新技术181

一、基因工程表达产物在动物疫病诊断中的应用181

二、实时荧光定量PCR技术192

三、实时PCR检测技术196