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第一章　实验动物设施的消毒与灭菌操作技术1

第一节　饲育器具及饲育室内物品的消毒与灭菌1

一、饲育架1

二、饲育笼2

三、垫料4

四、饲料盒、饮水瓶5

五、饲料5

六、饮水6

七、过滤器7

八、实验器具8

九、衣服类8

十、污物9

十一、动物尸体10

十二、运输笼11

十三、其他（工作车、拖鞋、笔记用品、门把手等）12

第二节　各种区域的消毒与灭菌13

一、验收、检疫区域13

二、普通动物的饲育区域——干式结构14

三、SPF动物的饲育区域14

四、无菌动物、悉生动物饲育区域14

五、感染实验区域15

第三节　各种动物室的消毒与灭菌15

一、啮齿类动物室15

二、兔饲育室17

三、犬饲育室18

四、灵长类饲育室19

第四节　各种区域内的消毒与灭菌20

一、从外部区域进入动物设施时20

二、SPF动物饲育区域内的操作22

第五节　各种病原体的消毒与灭菌24

一、细菌24

二、支原体30

三、真菌31

四、病毒34

第六节　微生物抵抗性试验法40

一、细菌40

二、真菌42

三、病毒42

第七节　消毒药的毒性及安全性44

一、乙醇44

二、异丙醇46

三、福尔马林47

四、碘伏48

五、次氯酸钠49

六、石炭酸50

七、甲酚皂51

八、氯化新洁尔灭52

九、洗必泰53

主要参考文献54

第二章　实验动物生产管理操作技术56

第一节　引进动物的操作程序56

一、引进动物的隔离检疫56

二、动物的引进56

第二节　饲育与喂食的操作程序58

一、动物一般状况的检查程序58

二、动物饲料的种类与处理方式58

三、动物饲育笼使用规格59

四、每种动物喂食次数及量60

五、饮水的添加60

第三节　动物识别与记录的操作程序61

一、动物个体的识别61

二、性别判定61

三、动物生产记录卡的填写62

第四节　光照、温度、湿度和洁净度控制的操作程序62

一、光照监控62

二、动物房温、湿度等环境指标62

三、动物房温、湿度记录63

四、动物房内空气洁净度的控制63

第五节　实验动物保种、生产的操作程序63

一、实验动物的保种63

二、实验动物的生产管理66

三、停止繁殖71

四、繁殖动物工作记录71

五、繁育性状的计算71

第六节　饲料管理操作程序72

一、饲料采购72

二、饲料进货与验收72

三、饲料及垫料的贮存72

第七节　生产管理中紧急事件处理的操作程序73

一、节假日值班73

二、紧急停电处理73

三、空调故障处理73

第八节　动物健康监测与饲养环境监测操作程序74

一、健康监测采样74

二、血清学病毒监测74

三、细菌学监测75

四、寄生虫学监测75

五、组织采样76

六、空气落菌数监测76

七、屏障系统内饮用水水质监测76

八、饲料微生物监测76

九、垫料微生物监测76

十、小鼠免疫球蛋白测定77

十一、实验鸡的病原微生物监测77

主要参考文献79

第三章　实验动物隔离器的操作技术80

第一节　隔离器操作人员守则80

一、操作人员须具备的基本条件80

二、操作人员工作前的准备80

三、隔离器操作结束后工作80

第二节　隔离器操作规程81

一、隔离器的安装81

二、隔离器的检漏82

三、隔离器的消毒与灭菌82

四、隔离器的使用83

五、隔离器相关设备的使用88

第三节　实验动物大、小鼠生物净化的操作规程89

一、器材的准备89

二、净化手术的准备89

三、生物净化的操作90

四、乳母哺育90

五、无菌试验90

第四节　隔离器内动物的保种与饲养管理91

一、近交系的保种方法91

二、远交群的保种方法91

三、突变系的保种方法92

四、核心保种群数据的记录与保存92

五、隔离器内动物的饲养管理93

主要参考文献94

第四章　实验动物胚胎、精子和卵巢冷冻保存的操作技术96

第一节　小鼠的体外受精与2-细胞胚胎的冷冻保存96

一、小鼠超数排卵96

二、小鼠精子的采集与体外授精98

三、小鼠胚胎玻璃化冷冻保存100

四、小鼠精子玻璃化冷冻保存104

五、精子的解冻及体外授精105

六、2-细胞胚胎输卵管内移植108

第二节　小鼠卵巢的冷冻、复苏与移植操作程序111

一、材料的准备111

二、卵巢的冷冻111

三、冷冻卵巢的融解112

四、卵巢的移植113

第三节　小鼠3日龄胚胎和大鼠5日龄胚胎缓慢冷冻的操作程序115

一、胚胎的采集115

二、胚胎的评价与选择115

三、0.25ml塑料受精麦管（保存胚胎用）的准备116

四、胚胎移入抗冷冻液116

五、胚胎移入麦管117

六、植冰与冷却117

七、胚胎贮藏117

第四节　小鼠3日龄、大鼠5日龄胚胎玻璃化冷冻保存的操作程序117

一、胚胎的评价与选择117

二、0.25ml塑料麦管准备117

三、在玻璃化溶液中平均存放胚胎118

四、玻璃化冷冻119

五、胚胎贮藏119

六、冷冻胚胎解冻119

七、在麦管中稀释胚胎冷冻保护剂液119

八、从麦管中回收胚胎119

九、胚胎体外培养120

十、甘油作为抗冷冻剂冷冻大鼠8-细胞胚胎120

十一、用甘油溶液缓慢冷冻的大鼠胚胎的复苏和移植122

十二、大鼠胚胎收集或剖腹取胎的同步发情123

第五节　实验兔胚胎的冷冻保存操作程序124

一、超数排卵和胚胎的采集124

二、精子的采集与人工授精124

三、兔桑椹胚的冷冻与复苏127

四、兔精子的冷冻与解冻128

五、2-细胞胚胎输卵管内移植129

六、桑椹胚的子宫内移植129

七、胚胎和胚胎移植针的准备130

第六节　各种培养基和抗冷冻剂配制的操作程序130

一、1000ml PB1溶液（基础保存液）的配制130

二、甘油溶液的配制131

三、蔗糖溶液的配制131

四、M16培养基的配制132

五、M2培养基的配制133

六、用浓缩液配制M2培养基和M16培养基134

七、小鼠体外授精培养液的配制137

八、VS3a玻璃化溶液的配制137

附录　胚胎、精子冷冻常用配方和记录表140

主要参考文献151

第五章　动物实验基础操作技术153

第一节　总则153

一、宗旨153

二、实验动物管理委员会的组成153

三、实验动物管理委员会的任务153

四、专业人员154

五、研究人员154

六、兽医师154

七、危险物品使用人员的资格154

八、实验动物管理人员的卫生与安全措施154

九、使用高危险性物品的动物实验155

十、其他注意事项155

十一、实验动物管理及使用手册之修订155

第二节　实验动物的抓取和保定操作程序156

一、实验动物抓取与保定的原则156

二、小鼠156

三、大鼠和沙鼠156

四、豚鼠157

五、兔157

六、犬157

七、蟾蜍157

第三节　实验动物分组和标记编号操作程序158

一、分组158

二、标记编号158

第四节　实验动物性别判定的操作程序159

一、小鼠、大鼠和沙鼠性别鉴定159

二、豚鼠性别判定160

三、兔子性别判定160

第五节　实验动物采血的操作程序160

一、大、小鼠采血160

二、豚鼠采血162

三、兔采血163

四、犬采血164

第六节　实验动物各种体液采集的操作程序165

一、淋巴液采集165

二、消化液采集165

三、尿液采集167

四、脑脊液采集168

五、胸水采集169

六、腹水采集169

七、精液采集169

八、阴道内液体采集170

九、骨髓采集170

第七节　实验动物麻醉的操作程序171

一、常用啮齿类动物的麻醉方法171

二、小鼠麻醉172

三、大鼠麻醉174

四、豚鼠麻醉176

五、仓鼠麻醉178

六、沙鼠麻醉180

七、实验兔麻醉181

八、实验猫麻醉184

九、实验犬麻醉186

十、实验猪麻醉188

十一、山羊麻醉190

十二、猴及其他灵长类麻醉192

十三、雪貂麻醉194

十四、鸟类与家禽类麻醉195

十五、爬行类动物麻醉196

十六、两栖类动物麻醉197

十七、鱼类动物麻醉197

十八、其他动物麻醉198

十九、主要麻醉药的共同麻醉深度判定指标198

第八节　实验动物术后照顾199

一、术后恢复期的照顾199

二、恢复期可能出现的危险199

三、术后疼痛的处理199

第九节　实验动物被毛去除方法200

一、拔毛法200

二、剪毛法200

三、剃毛法200

四、脱毛法200

第十节　实验动物给药的操作程序201

一、人与动物及各类动物间药物剂量的换算方法201

二、实验动物的给药204

第十一节　药品安全性试验操作程序206

一、单次给药毒性试验206

二、反复给药毒性试验207

三、生殖、发育毒性试验209

四、致突变试验211

五、致癌试验213

主要参考文献215

第六章　各种实验动物的实验操作技术216

第一节　大鼠216

一、抓取和保定216

二、性别鉴定216

三、日龄判断217

四、标记217

五、被毛去除218

六、给药219

七、麻醉223

八、处死225

九、体液采集226

十、尸检及主要脏器采取231

第二节　小鼠233

一、抓取和保定233

二、性别鉴定233

三、日龄判断234

四、标记234

五、被毛去除235

六、给药236

七、麻醉241

八、处死242

九、体液采集243

十、尸检及主要脏器采取248

第三节　豚鼠250

一、抓取和保定250

二、性别鉴定251

三、日龄判断251

四、标记251

五、被毛去除252

六、给药252

七、麻醉256

八、处死257

九、体液采集258

十、尸检及主要脏器采取261

第四节　兔262

一、抓取和保定262

二、性别鉴定262

三、年龄判断263

四、标记263

五、被毛去除264

六、给药265

七、麻醉268

八、处死269

九、体液采集270

十、尸检及主要脏器采取273

第五节　犬274

一、抓取和保定274

二、性别鉴定275

三、年龄判断275

四、标记276

五、被毛去除276

六、给药277

七、麻醉279

八、处死280

九、体液采集281

十、尸检及主要脏器采取282

第六节　猕猴284

一、抓取和保定284

二、性别鉴定285

三、年龄判断285

四、标记286

五、被毛去除286

六、给药287

七、麻醉289

八、处死290

九、体液采集290

十、尸检及主要脏器采取292

第七节　猪294

一、抓取和保定294

二、性别鉴定294

三、年龄判断294

四、标记295

五、被毛去除296

六、给药296

七、麻醉298

八、处死300

九、体液采集300

十、尸检及主要脏器采取303

第七章　实验动物相关实验室管理操作技术305

第一节　实验室工作管理规程305

一、寄生虫实验室305

二、细菌实验室306

三、病毒实验室检测308

四、病理实验室检测309

五、遗传实验室检测310

六、环境营养实验室检测312

七、检测实验室相关仪器的管理规程313

第二节　质量检测实验室各岗位职责313

一、质量监督员岗位职责313

二、检测业务管理员的职责（兼）314

三、标准收集员的职责（兼）314

四、仪器管理员的职责（兼）314

五、各检测实验室复核员的职责315

六、各专业检测实验室技术人员的职责315

第三节　各种管理规程和操作细则的管理316

第四节　实验室管理规程317

一、采样室（包括细胞培养室）317

二、动物实验室318

三、实验室清洁卫生规程318

四、实验室的消防规程318

第五节　实验室安全、保密规程319

一、实验室安全规程319

二、标准菌株与毒种安全规程320

三、实验室保密规程320

四、实验室出入规程320

第六节　质量检测操作规程320

一、样品管理规程320

二、原始记录管理规程321

三、检验报告审查签发管理规程322

四、复检及仲裁规程322

五、检测事故分析报告操作规程323

第七节　仪器设备的管理规程323

一、仪器设备的管理程序323

二、仪器使用保管操作程序324

三、计量器具管理规程324

四、计量器具检定的操作程序324

五、计量器具使用维护保养操作程序325

第八节　检测实验室其他管理规程325

一、检测收费财务操作规程325

二、检测人员培训、考核规程325

第八章　实验动物相关设备的使用与维护操作技术327

第一节　屏障设施相关设备的使用与维护327

一、空调系统327

二、送、排风机组329

三、消毒灭菌系统329

四、发电机333

五、空调自动化控制系统334

六、逆渗透（RO）纯水设备334

七、空气过滤器335

第二节　屏障设施相关饲育设备的使用与维护336

一、独立送风隔离笼具（IVC）336

二、超净工作台339

三、层流架340

四、淋浴室341

第三节　感染动物实验室（P3实验室）运行及操作规范341

一、P3实验室运行规范341

二、P3实验室操作规范342

三、EPC的使用与维护342

第四节　实验动物废弃物处理的操作规范343

主要参考文献344

第九章　实验动物饲料生产的操作技术345

第一节　饲料生产各工段的操作要点345

一、饲料生产前的技术检查和准备345

二、各工段的操作要点345

第二节　实验动物配合饲料品质保证技术347

一、饲料产品的安全性347

二、饲料加工的质量保证技术350

三、饲料的安全性控制352

第三节　实验动物饲料质量检验基本要求353

第四节　350型实验动物饲料机组的操作程序354

一、开机354

二、投料员355

三、粉碎员355

四、制粒员356

五、出料员357

六、配料员357

七、动物实验料加工358

八、辐照料加工358

九、饲料厂设备维护、保养计划359

十、饲料加工机组的维护保养规范359

第五节　饲料生产相关物品进出的操作程序360

一、原料采购质量控制360

二、加工工艺流程质量控制362

三、成品料质量控制362

四、成品的入库363

五、自用成品料管理363

第六节　实验动物饲料生产相关管理制度364

一、饲料厂（车间）环境卫生管理规范364

二、饲料厂（车间）日常管理制度364

三、饲料部安全生产管理规范365

第十章　实验动物突发事件应急处理的操作技术366

第一节　突发事件分类及应急通知系统366

一、实验动物设施可能出现的突发事件366

二、突发事件应急处理通知系统的建立366

三、突发事件应急处理工作小组的建立366

第二节　常见突发事件应急处理的操作程序367

一、动物咬伤367

二、种群动物感染367

三、意外断电367

四、漏电368

五、瓦斯溢气368

六、火灾368

七、断水369

八、净化空调箱故障369

九、高压灭菌器故障369

第三节　化学品泄漏与污染时的应急处理操作程序370

一、化学品泄漏与污染预防的操作程序370

二、化学品泄漏与污染应急处理的操作程序370

第四节　实验动物污染时应急处理的操作程序371

一、病原体污染时首先应采取的对策371

二、污染动物的一般处置与生物净化372

三、污染饲养室的净化373

第五节　检测实验室突发事件处理的操作程序374

一、突发停水374

二、突发停电374

三、发现样品变质374

四、样品倾翻374

第六节　其他突发事件的应急处理操作程序375

一、人员意外伤害375

二、自然灾害危机处理375

三、人为灾害危机375