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Ⅰ总 论1

微生物的保存法1

（森地敏树，山里一英，铃木正敏，高野光男，根井外喜男）1保存菌种的目的1

目 录1

2传代培养保存法2

3液体石蜡覆盖保存法3

4载体保存法5

4-1土壤保存法5

4-2砂土保存法6

4-3硅胶保存法7

4-5纸垫片保存法（滤纸保存法）8

4-4磁珠保存法8

5悬液保存法9

5-1蒸馏水保存法9

5-2糖液保存法12

5-3其他悬液保存法12

6寄主保存法12

7冷冻保存法12

7-1一般注意事项12

7-2低温冰箱保存法14

7-4液氮保存法15

7-3干冰保存法15

8冷冻干燥保存法19

8-1冷冻干燥法的原理和适用范围19

8-2冷冻干燥保存概要21

8-3冷冻干燥前的培养条件24

8-4菌株号码等的标记25

8-5安瓿的准备25

8-6添加保护剂（制备分散剂）27

8-7制备菌液29

8-8菌液分装安瓿的方法30

8-9预冷31

8-10干燥34

8-11二次干燥41

8-12熔封42

8-13保存条件46

8-14安瓿的启封46

8-15复水47

8-16主要的测定仪器47

8-17含水量的测定法50

8-18保存效果的短期鉴定法52

8-19防止突变53

8-20病原微生物冷冻干燥时应注意的事项56

8-21冷冻干燥有困难的微生物及其对策57

9 冷冻干燥以外的干燥保存法58

9-1常压干燥保存法（风干保存法）58

9-2 Stamp干燥保存法（明胶片干燥保存法）59

9-3菌片封袋干燥保存法60

9-4 Sordelli干燥保存法61

9-5 L－干燥保存法（真空干燥保存法）63

文 献76

1 前 言84

Ⅱ各 论84

1 动物病毒的保存法 （赤尾赖幸）84

2低温保存法88

3冷冻保存法88

4冷冻干燥保存法90

5各群病毒的保存法91

文 献98

2植物病毒的保存法 （脇本哲）99

1 前 言99

2冷冻保存法100

1-2与保存有关的因素100

1-1保存的预先处理100

3干燥保存法101

4冷冻干燥保存法101

4-1寄主植物的种类102

4-2实际操作102

4-3分散剂102

植物病毒的保存方法和保存效果一览103

文 献118

1-2噬菌体悬液的制备119

1-1一般注意事项119

1 前 言119

3噬菌体的保存法 （饭岛贞二）119

2低温保存法120

3冷冻保存法121

4液氮保存法121

5冷冻干燥保存法122

6 L－干燥保存法122

7其他保存法123

噬菌体的保存方法和保存效果一览123

文 献126

1-1病原细菌的保存目的127

1 前 言127

——医学领域 （三输谷俊夫，田中吉纪）127

4病原细菌的保存法（Ⅰ）127

1-2菌株保存法128

2传代培养保存法128

3冷冻保存法129

4冷冻干燥保存法129

4-1细菌悬液的准备130

4-2安瓿的灭菌和冷冻干燥131

4-3冷冻干燥样品的保存132

4-4冷冻干燥样品的复原132

4-5复水液133

4-6在冷冻干燥保存法中存在的问题134

5 Stamp氏明胶片干燥保存法134

5-1培养菌134

5-2分散剂134

5-3石蜡滤纸135

5-4干燥法135

5-5保存法136

5-6保存菌的复原137

5-7其他注意事项137

培养基的组成和配制法138

分散剂（保护剂）的配制150

病原细菌的保存方法和保存效果一览153

文 献157

〔附记〕 东京大学医学科学研究所关于病原细菌冷冻保存和冷冻干燥保存的实例 （帖佐浩）1传代培养基158

2分散剂（保护剂）的配制159

冷冻保存和冷冻干燥保存的实验成绩160

5病原细菌的保存法（Ⅱ）162

——兽医学领域 （柚木弘之）162

1 前 言162

3冷冻保存法163

4冷冻干燥保存法163

2传代培养保存法163

4-1菌悬液的制备164

4-2保护剂和保存温度164

4-3冷冻干燥菌株的变异164

4-4冷冻干燥菌株的复原165

5 明胶片干燥保存法165

培养基的组成和配制165

分散剂（保护剂）的组成170

兽医学领域内病原细菌的保存法和保存效果一览170

文 献173

1 前 言174

6植物病原细菌的保存法 （脇本哲）174

2传代培养保存法175

3液体石蜡覆盖保存法175

4土壤保存法176

5水液保存法176

6冷冻保存法177

7冷冻干燥保存法177

培养基的组成和配制178

分散剂（保护剂）的组成181

植物病原细菌的保存法和保存效果一览182

文 献188

7非病原需氧性细菌的保存法 （山里一英）190

1 前 言190

2传代培养保存法190

2-1琼脂斜面培养基密封保存法191

2-2软琼脂法192

3 液体石蜡覆盖保存法192

4土壤保存法193

4-1芽孢杆菌芽孢的土壤保存法194

4-2根瘤菌孢囊的土壤保存法194

5硅酸胶保存法194

6磁珠保存法195

7 悬液保存法196

8冷冻保存法196

9冷冻干燥保存法198

10 Sordelli氏干燥保存法201

11 L－干燥保存法201

12其他干燥保存法201

12-1 Stamp氏干燥保存法202

12-2Kerr氏干燥保存法202

12-3常压干燥保存法（风干保存法）202

培养基的组成和配制203

12-5袋装尼龙薄膜片（Disc-in-bag）干燥保存法203

12-4 Brown氏干燥保存法203

分散剂（保护剂）的组成和配制法236

非病原需氧性细菌的保存法和保存效果一览239

文 献253

8厌氧菌的保存法 （铃木祥一郎，上野一惠）257

1 前 言257

2传代培养保存法258

3 液体石蜡覆盖保存法259

4 PRAS （Pre-Reduced Anaerobically Sterilized259

预先还原无氧灭菌的）培养基的传代培养法259

5-1去纤维羊血保存法260

5冷冻保存法260

5-2脱脂乳保存法261

6冷冻干燥保存法262

7 明胶片干燥保存法263

培养基的组成和配制法263

厌氧菌的保存法和保存效果一览274

文 献282

1 前 言283

1-1需氧性和兼性厌氧放线菌的保存283

9放线菌的保存法 （清野昭雄）283

1-2生产菌株的保存284

1-3遗传标志的保存285

1-4放线菌类各属的保存285

2传代培养保存法285

2-1维持培养基285

2-2放线菌类用琼脂培养基一览288

3液体石蜡覆盖保存法288

4土壤保存法288

6-1厌氧性放线菌类的冷冻保存法289

6-2液氮保存法289

6冷冻保存法289

5干曲保存法289

7冷冻干燥保存法290

培养基的组成和配制法290

分散剂（保护剂）的组成297

放线菌的保存法和保存效果一览298

文 献301

10支原体（Mycoplasma）的保存法 （柚木弘之，帖佐浩）1前 言303

2冷冻保存法303

2-1菌悬液的配制法304

3冷冻干燥保存法305

2-3保护剂和保存温度305

2-2支原体的菌量测定305

3-1菌悬液的配制法306

3-2保护剂306

3-3冷冻干燥菌株的保存306

3-4冷冻和冷冻干燥菌株的变异306

3-5冷冻干燥菌的复原307

培养基的组成和配制法307

分散剂（保护剂）的组成314

支原体的保存法和保存效果一览314

文 献318

2-1传代培养保存法319

2钩端螺旋体（Leptoospira）的保存法319

11 病原螺旋体的保存法 （梁川良）319

1 前 言319

2-2冷冻保存法320

2-3冷冻干燥保存法320

3 密螺旋体（Treponema）的保存法321

3-1传代培养保存法321

3-2冷冻保存法322

3-3冷冻干燥保存法322

4-1传代培养保存法323

4-2冷冻保存法323

4疏螺旋体（Borrelia）的保存法323

4-3冷冻干燥保存法324

培养基、分散剂的组成和配制法324

文 献329

12立克次氏体的保存法 （宍户亮）331

1 前 言331

2冷冻保存法332

3冷冻干燥保存法333

3-1材料333

3-2分散剂333

3-3应用333

立克次氏体保存法一览334

文 献335

13病原真菌的保存法 （岩田和夫）336

1 前 言336

2传代培养保存法337

2-1真菌保存用培养基337

2-2传代间隔338

2-3保存场所应具备的条件338

2-4移植时应注意的事项339

3 矿油覆盖保存法（液体石蜡覆盖保存法）340

5蒸馏水保存法341

4土壤或砂基保存法341

6冷冻保存法342

7冷冻干燥保存法342

8 防止变异应注意的事项343

9在保存中防止污染的方法344

文 献345

14酵母菌的保存法 （高田信男）346

1 前 言346

2传代培养保存法346

3液体石蜡覆盖保存法（矿油覆盖保存法）347

4土壤保存法348

6冷冻保存法349

6-1冷冻前的培养条件349

5蒸馏水保存法349

6-2冷冻和融解速度351

7冷冻干燥保存法352

7-1冷冻干燥的分散剂（保护剂）353

7-2冷冻干燥前的各种条件353

8其他干燥保存法355

9适合于酵母菌长期保存的保存法355

7-3冷冻和干燥条件以及冷冻干燥后的保存条件355

培养基、分散剂（保护剂）的组成和配制法356

酵母菌的保存法和保存效果一览357

文 献361

15丝状菌的保存法（Ⅰ）363

——曲霉属、青霉属和孢子囊菌类、藻菌类363

（阿部重雄）363

1 前 言363

2传代培养保存法363

3矿油覆盖保存法（液体石蜡覆盖保存法）363

6冰箱保存法364

5硅胶保存法364

4土壤保存法364

7液氮保存法365

8冷冻干燥保存法365

9其他干燥保存法365

培养基的组成和配制法366

保护剂（分散剂）的组成369

曲霉、青霉和子囊菌类、藻菌类的保存法、保存效果369

一览369

文 献391

1 前 言394

2担子菌类的保存法394

——担子菌类和半知菌类 （横山竜夫）394

16丝状菌的保存法（Ⅱ）394

3半知菌类的保存法397

3-1传代培养保存法397

3-2液体石蜡覆盖保存法398

3-3土壤保存法398

3-4硅胶保存法398

3-5风干保存法（自然干燥保存法）399

3-6冷冻保存法399

3-9 L－干燥保存法400

3-8冷冻干燥保存法400

3-7液氮保存法400

培养基的组成和配制法401

保护剂（分散剂）的组成409

担子菌类和半知菌类的保存法和保存效果一览410

文 献431

17微小藻类的保存法（Ⅰ）436

——微小藻类的传代保存法436

（市村辉宜，伊藤忠夫）436

1前 言436

2传代培养保存法436

2-1藻株的性状437

2-2维持培养基438

2-3培养条件和保存条件438

2-4移植间隔439

2-5讨论439

维持培养基的组成439

东京大学应用微生物研究所微小藻类系统保存株和保450

存法一览450

文 献462

2冷冻干燥保存法464

1 前 言464

（都留信也）464

——微小藻类的冷冻和冷冻干燥保存法464

18微小藻类的保存法（Ⅱ）464

3冷冻保存法466

微小藻类的保存法和保存效果一览468

文 献471

19病原原生动物的保存法 （常松之典）472

1 前 言472

2锥体虫属（Trypanosoma）的冷冻保存474

3利什曼虫属（Leishmania）的冷冻保存475

4 毛滴虫属（Trichomonas）的冷冻保存475

5 内变形虫属（Entamoeba）的冷冻保存476

6疟原虫属（Plasmodium）的冷冻保存477

7 弓型属（Toxoplasma）的冷冻保存478

病原原生动物的保存法和保存效果一览478

文 献485

20非病原原生动物的保存法 （松坂理夫）487

1 前 言487

2冷冻保存法487

非病原原生动物的保存法和保存效果一览488

文 献489

微生物学名索引490